БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 12, с. 1670–1678
УДК 577.152.24
Роль гликозилирования в поддержании структуры и функциональной целостности галектина-1, полученного из сердца буйвола
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: галектин-1 из сердца буйвола (BfHG-1), гликозилирование, дегликозилирование, дегликозилированный BfHG-1 (dBfHG-1), окисление.
Аннотация
Галектин-1, выделенный из сердца буйвола и очищенный методом гель хроматографии, содержит 3,55% углеводов. Он является первым и пока единственным представителем семейства миокардиальных галектинов млекопитающих, который гликозилирован в естественных условиях. В связи с этим, особое значение приобретает изучение процесса дегликозилирования этого белка. Для выяснения роли углеводного компонента были изучены физико-химические свойства двух различных форм очищенного галектина-1. Обнаружено, что гликозилированная форма проявляет большую устойчивость при повышении температуры и активна в более широком диапазоне pH. Значительные различия между двумя формами белка выявляются также при их обработке тиол-специфичными реагентами, денатурирующими агентами и детергентами. В присутствии этих соединений дегликозилированный галектин характеризуется более высокой степенью тушения флуоресценции. Кроме этого, исследования с использованием методов кругового дихроизма и инфракрасной спектроскопии показали, что дегликозилирование очищенного галектина и его обработка различными химическими реагентами приводят к нарушению регулярной вторичной структуры нативного белка. Это свидетельствовало о значительной роли углеводных цепей в поддержании молекулы галектина в активной конформации. Обнаружение нами существенных различий в свойствах нативного и дегликозилированного галектина-1 является новым подтверждением важности процесса гликозилирования белков и указывает на его значимость в биологии и клинике.