БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 11, с. 1601–1611
УДК 577.352.33
Сезонные изменения в обогащенной NA,K-ATPазой микросомальной фракции из почек сусликов Spermophilus undulatus
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: гибернация, Na,K-ATPаза, микровязкость мембран, агрегация белков, почки, суслики Spermophilus undulatus.
Аннотация
Установлено, что активность Na,K-ATPазы в микросомальной фракции, выделенной из почек зимних спящих сусликов, в 1,8–2,0 раза ниже, чем у летних активных животных, что лишь частично связано со снижением содержания белка Na,K-ATPазы в этих препаратах (на 25%). С помощью антител к разным изоформам α-субъединицы Na,K-ATPазы в результате анализа ингибирования фермента уабаином установлено, что снижение активности Na,K-ATPазы при гибернации не обусловлено изменением ее изоферментного состава. Не обнаружено также сезонных изменений уровня фосфорилирования α-субъединицы Na,K-ATPазы эндогенными протеинкиназами. Среди фосфорилируемых белков микросом не выявлено белков, являющихся потенциальными регуляторами активности Na,K-ATPазы. Анализ состава и свойств липидной фазы микросом показал, что общая степень ненасыщенности жирных кислот и соотношение липид/белок при гибернации достоверно не изменяются, в то время как содержание холестерина в препаратах из почек у спящих сусликов примерно вдвое выше, чем у активных животных. С использованием спиновых и флуоресцентного зондов обнаружено, что различие в содержании холестерина не влияет на общую микровязкость мембран микросом. С помощью сшивающего агента о-фенантролина в комплексе с ионами меди установлено, что в мембранах микросом, выделенных из почек спящих сусликов Na,K-ATPаза находится в более агрегированном состоянии по сравнению с мембранами микросом из почек активных животных. Предполагается, что снижение активности Na,K-ATPазы в почках сусликов при гибернации обусловлено главным образом кластеризацией белков в плазматической мембране.