БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 11, с. 1596–1600
УДК 577.152.313
Свойства частично очищенной эндополифосфатазы дрожжей Saccharomyces cerevisiae
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: неорганические полифосфаты, эндополифосфатаза, экзополифосфатаза, цитозоль, мутант по генам PPX1 и PPN1, Saccharomyces cerevisiae.
Аннотация
Из цитозоля дрожжей Saccharomyces cerevisiae с инактивированными генами PPX1 и PPN1, кодирующими экзополифосфатазы, с помощью ионообменной и аффинной хроматографии получена частично очищенная эндополифосфатаза. Активность фермента оценивали по уменьшению длины цепи полифосфатов, определяемой с помощью электрофореза этих полимеров в ПААГ. Фермент расщеплял неорганические полифосфаты без высвобождения ортофосфата (Рi), ингибировался гепарином и был нечувствителен к фториду. Mg2+, Mn2+ и Co2+ в концентрации 1,5 мМ стимулировали активность, а Cа2+ не оказывал на нее влияния. Молекулярная масса эндополифосфатазы, определенная методом гель-фильтрации, составила ~20 кДа.