БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 11, с. 1583–1595
УДК 577.083.03
Взаимодействие вируса шарки сливы с антителами, конъюгированными с коллоидным золотом, и разработка иммунохроматографической тест-системы для детекции вируса
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: вирус шарки сливы, моноклональные антитела, коллоидное золото, просвечивающая электронная микроскопия, атомно-силовая микроскопия, иммунохроматографический анализ.
Аннотация
Получены два препарата моноклональных антител (АТ) против вируса шарки сливы (ВШС), распознающие штаммы D, М и С ВШС. Синтезированы конъюгаты этих АТ с наночастицами коллоидного золота (КЗ) среднего диаметра 26 нм. На приборе Biacore Х определены константы связывания нативных и конъюгированных с КЗ антител с ВШС. Методами просвечивающей электронной микроскопии и атомно-силовой микроскопии охарактеризованы комплексы, образуемые конъюгатами антитело–коллоидное золото с вирионами ВШС. С использованием конъюгатов АТ-КЗ оптимального состава разработан иммунохроматографический метод детекции ВШС, характеризующейся пределом обнаружения 3 нг/мл и длительностью 10 мин. Проведена апробация метода при определении ВШС в образцах листьев косточковых плодовых культур. Показано соответствие результатов, получаемых с помощью иммунохроматографической тест-системы и «сэндвич»-варианта иммуноферментного анализа. Разработанная тест-система может быть использована в полевых условиях и найти применение при мониторинге вирусной инфекции и в карантинных целях.