БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 11, с. 1544–1552
УДК 547.962
Исследование взаимодействия церулоплазмина с серпроцидинами
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: церулоплазмин, азуроцидин, нейтрофильная эластаза, катепсин G, протеиназа-3, белок-белковые взаимодействия.
Аннотация
Исследовалось образование комплексов церулоплазмина (CP) с белками семейства серпроцидинов: азуроцидином (CAP37), нейтрофильной эластазой (NE), катепсином G (CG) и протеиназой-3 (PR3). Было отмечено, что при гель-фильтрации серпроцидины формируют комплексы с CP в молярном соотношении 1 : 1. Ингибитор сериновых протеиназ PMSF не препятствовал взаимодействию серпроцидинов с CP при диск-электрофорезе без детергентов. CP влиял на активность NE, CG и PR3 как обратимый конкурентный ингибитор c Ki ~1 мкМ. Ингибирующий эффект CP зависел от ионной силы раствора и практически отсутствовал при концентрации NaCl выше 300 мМ. Серпроцидины угнетали оксидазную активность CP в отношении п-фенилендиамина как обратимые конкурентные ингибиторы. Наибольшее влияние при этом оказывал CAP37 (Ki ~20 нм). При добавлении разных серпроцидинов к плазме крови человека, крысы, мыши, кролика, дельфина, собаки и лошади только САР37 образовывал комплекс с СР. Синтетический пептид RKARPRQFPRRR (5–13, 61–63 CAP37) вытеснял CAP37 из комплекса с CP. Добавление CAP37 к тройному комплексу CP с лактоферрином и миелопероксидазой вызывало вытеснение последней из комплекса с CP. Константа диссоциации CAP37 с иммобилизованным CP составила 13 нм. Таким образом, специфическим партнером CP среди серпроцидинов является CAP37.