Влияние дистамицина, хромомицина и УФ-света на экстракцию полиглутаминовой кислотой гистона Н1 из ядер печени крысы

Аннотация

Проведено фракционирование гистона Н1 ядер печени крысы по прочности связи с хроматином с помощью полиглутаминовой кислоты (ПГ) в присутствии антибиотиков дистамицина А (ДМ) и хромомицина А₃ (ХМ). Обнаружено, что без антибиотиков ПГ экстрагирует из ядер примерно половину ядерного гистона Н1. ДМ или ХМ, добавленные к ядрам в насыщающей концентрации, ослабляют взаимодействие с хроматином большей части Н1. Титрование ядер ДМ показывает, что число мест связывания ДМ в ядрах всего на 20–25% меньше, чем в выделенной из них ДНК, и это различие исчезает после обработки ядер ПГ. Пониженный КД комплексов ДМ с ядрами по сравнению со свободной ДНК свидетельствует об изменении способа взаимодействия ДМ с ДНК в ядерном хроматине. Отмечено, что ~25% ядерного гистона Н1 чувствительно к действию только ДМ, а 5% – только ХМ. Половина фракции чувствительного к действию ДМ гистона Н1, по-видимому, в конденсированном хроматине связана иначе, чем в развернутом. Небольшая доля (~3%) гистона Н1 остается связанной с ядерным хроматином независимо от присутствия антибиотиков. Подтипы гистона из зоны Н1А более чувствительны к действию ДМ, а из зоны Н1В – к ХМ. Облучение УФ-светом приводит к дозозависимой фиксации в ядре до 50% гистона Н1, который не извлекается обработкой кислотой и не выявляется в Na-Ds-электрофорезе. ПГ sp;ДМ экстрагирует из фиксированного облучением ядерного хроматина только ~3% Н1. Обработка ядер ДМ перед облучением приводит уже к экстракции всей чувствительной к ДМ фракции гистона Н1 (~25%), которая в этом случае не фиксируется в ядре. Обсуждается гипотеза о возможной роли обнаруженных фракций гистона Н1 в структурной организации хроматина.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: