БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 10, с. 1462–1470
УДК 577.152.34
Характеристика цинкзависимой эндопептидазы Вacillus intermedius
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: металлопротеиназа, астацины, адамализины/репролизины, метцинкины, Bacillus subtilis, Bacillus intermedius.
Аннотация
Выделена новая цинкзависимая металлоэндопептидаза Bacillus intermedius (MprBi) из культуральной жидкости рекомбинантного штамма Bacillus subtilis. Установлена аминокислотная последовательность гомогенного белка методом масс-спектрометрии MALDI-TOF. Определена N-концевая аминокислотная последовательность зрелого белка – ASTGSQKVTV. Определены физико-химические свойства фермента, его субстратная специфичность. Молекулярная масса металлопротеиназы равна 19 кДа, Km = 0,06 мМ, kcat = 1210 с–1,изоэлектрическая точка – 5,4. Изучено влияние на активность фермента различных ингибиторов и ионов металлов. На основе анализа аминокислотной последовательности расширенного мотива активного центра и Met-поворота, а также свойств белка сделано заключение, что бактериальная металлопротеиназа MprBi относится к семейству эндопептидаз адамализинов/репролизинов клана метцинкинов.