БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 10, с. 1451–1461
УДК 577.322.75
Окислительная модификация фрагментов D и E фибриногена под действием озона
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: фибриноген, фрагменты D и E, фактор XIIIa, окисление, конформация.
Аннотация
Исследовали инициированное озоном свободнорадикальное окисление фрагментов D и E фибриногена. С помощью методов упругого и динамического светорассеяния, электрофореза невосстановленных образцов обнаружено ускорение ферментативной реакции ковалентного сшивания молекул индуцированно-окисленного фрагмента D в присутствии XIIIa фактора, сопровождающееся накоплением большего количества γ-димеров относительно неокисленного фрагмента D. Данные УФ- и ИК-спектроскопии свидетельствуют о том, что процесс окисления аминокислотных остатков полипептидных цепей фрагментов D и E затрагивает прежде всего циклические и аминные группы с образованием кислородсодержащих продуктов. Сравнение дифференциальных ИК-спектров, полученных для фрагментов Е и D фибриногена при их свободнорадикальном окислении под действием озона, указывает на более заметную трансформацию функциональных групп фрагмента D. С помощью ЭПР-спектроскопии выявлено уменьшение времен корреляции вращения спиновых меток на озонированных белках по сравнению с неозонированными. Сопоставление времен корреляции вращения радикалов, ковалентно связанных с фрагментами, позволяет сделать вывод о более значительном локальном изменении конформации D фрагмента в результате окислительной модификации. Обсуждаются возможные причины различной окислительной способности D и Е фрагментов.