БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 10, с. 1446–1450
УДК 577.152.315
Нейтральная эндопептидаза неприлизин, соочищающаяся Na,K-ATPазой из почек кролика, осуществляет гидролиз ее α-субъединицы
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Na,K-АТРаза, протеолиз, неприлизин, почки млекопитающих, масс-спектрометрия.
Аннотация
Показано, что препараты Na,K-ATPазы из наружного медуллярного слоя почек кролика, полученные по методу П. Йоргенсена, содержат в качестве примеси протеазу, которая после проведения одномерного ЭФ в ПААГ в присутствии Ds-Na движется в одной белковой полосе вместе с α-субъединицей Na,K-ATPазы (молекулярная масса ~100 кДа). После электроэлюции белков этой полосы из ПААГ наблюдается появлению двух белковых фрагментов (~67 и 55 кДа), которые взаимодействуют с поликлональными антителами против α-субъединицы Na,K-ATPазы. С использованием масс-спектрометрии (метод LC/MS/MS) показано, что в одной белковой полосе с α-субъединицей Na,K-ATPазы движется мембраносвязанная нейтральная эндопептидаза неприлизин. Добавление тиорфана, специфического ингибитора нейтральных эндопептидаз, устраняло протеолиз α-субъединицы. Полученные результаты свидетельствуют, что α-субъединица Na,K-ATPазы может быть природным субстратом для неприлизина.