БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 10, с. 1435–1445
УДК 577.152.41
Кинетические и спектральные параметры взаимодействия Citrobacter freundii метионин–γ-лиазы с аминокислотами
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: метионин–γ-лиаза Citrobacter freundii, пиридоксаль-5'-фосфат, субстраты, ингибиторы, обмен протонов, спектральные характеристики.
Аннотация
Определены кинетические параметры метионин–γ-лиазы Citrobacter freundii в реакциях с субстратами γ-элиминирования и ингибирование фермента в реакции γ-элиминирования L-метионина аминокислотами различного строения. Полученные данные указывают на важный вклад атома серы и метиленовых групп в эффективность связывания субстратов и ингибиторов. Определены константы скоростей катализируемого ферментом обмена С-α- и C-β-протонов ряда ингибиторов на дейтерий и кинетический изотопный эффект дейтериевой метки в С-α-положении ингибиторов на скорости обмена их β-протонов. Не обнаружено стереоселективности при обмене β-протонов и заметного изотопного эффекта дейтерия в С-α-положении на скорость обмена C-β-протонов. Определен ионный и таутомерный состав внутреннего основания Шиффа метионин–γ-лиазы. Получены спектральные характеристики (спектры поглощения и кругового дихроизма) комплексов фермента с субстратами и ингибиторами. Спектральные и кинетические данные указывают на то, что скорость-лимитирующей стадией ферментативной реакции является стадия дезаминирования аминокротоната.