БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 10, с. 1424–1434
УДК 577.23
Протон-транслоцирующая АТРаза Paracoccus denitrificans: кинетика окислительного фосфорилирования
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Fo·F1-H+-АТР синтаза, окислительное фосфорилирование, суббактериальные частицы, Paracoccus denitrificans.
Аннотация
Измерены начальные скорости синтеза АТР прочно-сопряженными фрагментами плазматической мембраны Paracoccus denitrificans. Скорость реакции гиперболически зависит от концентрации субстратов: ADP и неорганического фосфата (Pi). Км для ADP и Pi при рН 8,0, избытке Мg2+ и насыщающей концентрации второго субстрата равны 7–11 и 60–120 мкМ соответственно. Эти величины зависят от степени сопряженности препаратов мембран. Связывание субстратов в реакции синтеза АТР происходит независимо (величина Км для одного из субстратов не зависит от концентрации другого). Снижение величины трансмембранного электрохимического градиента протонов при добавлении малоната (субстрат дыхания − сукцинат) или за счет уменьшения стационарной концентрации NADH при его окислении приводит к пропорциональному уменьшению как максимальных скоростей синтеза АТР, так и величин Км для ADP и Pi (кажущийся механизм двойного замещения, пинг-понг механизм). Кинетическая схема протекания окислительного фосфорилирования сопоставлена с моделью протон-транслоцирующей АТР-гидролазной реакции, катализируемой тем же препаратом мембран [10] [Zharova, T.V. and Vinogradov, A.D. (2006) Biochemistry, 45, 14552–14558].