БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 8, с. 1070–1078
УДК 577.1
Исследование механизма активации р38 MAPK кардиотоническими стероидами в клетках эпителия дистального отдела почечных канальцев
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Na,K-ATPaза, уабаин, ионофоры, внутриклеточный Na+ и K+, p38 MAPK, почки, клеточная смерть.
Аннотация
Уабаин и другие кардиотонические стероиды (КТС) вызывают гибель клеток эпителия дистального отдела почечных канальцев (С7-MDCK) путем взаимодействия с Na,K-АТРазой, но независимо от ингибирования ионных потоков, осуществляемых этим ферментом. Недавно было установлено, что гибель С7-MDCK клеток, обработанных уабаином, предотвращается при закислении цитоплазмы и ингибировании р38 МАРК, активация которой предшествует гибели клеток. В данной работе мы провели изучение механизма активации р38 МАРК кардиотоническими стероидами. Сравнение действия уабаина на фосфорилирование р38 МАРК и концентрацию внутриклеточного Na+ и K+ в средах с различным содержанием K+, а также в присутствии Na+-ионофора монензина и неселективного Na+/К+ ионофора нигерицина показало, что активация р38 МАРК не связана с ингибированием ионных потоков, осуществляемых Na,K-АТРазой, и увеличением соотношения [Na+]i/[K+]i. Мы не обнаружили изменений в фосфорилировании р38 МАРК при снижении рН от 7,45 до 6,75. Фосфорилирование р38 МАРК, вызванное уабаином, не устранялось в присутствии ингибиторов протеинкиназ А, С и G и при ингибировании серин-треониновых фосфатаз окадоевой кислотой, оно не сопровождалось также активацией тирозиновых протеинкиназ. Полученные данные свидетельствуют о том, что активация р38 MAPK и его цитотоксическое действие не зависят от изменения внутриклеточных концентраций Na+, K+ и Н+. Дальнейшие исследования должны установить природу посредников цитотоксического сигнального каскада, запускаемого КТС через конформационные перестройки Na,K-АТРазы и приводящего к активации р38 МАРК.