БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 7, с. 1023–1030
УДК 577.121.7
Конформационные изменения в области активного центра цитохрома P450 при связывании двух разных лигандов
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: цитохром P4502B4 (CYP2B4), лиганды, спиновая метка, спектры ЭПР, субстраты, конформация.
Аннотация
Показано, что стабильный нитроксильный радикал 4-циано-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил образует комплекс с цитохромом P4502B4 по аналогии с субстратами второго типа, присоединяясь непосредственно к пентакоординированному железу гема. Связанный радикал недоступен водорастворимым парамагнитным ионам, что подтверждает его локализацию в гидрофобном окологемовом кармане. Бензфетамин и N,N-диметиланилин, неполярные субстраты первого типа, индуцируют конформационные изменения спин-меченого гемопротеина, сопровождающиеся, по-видимому, расширением кармана, в результате которого возникает контакт с водной фазой, и связанная с гемом спиновая метка становится доступной водорастворимым парамагнетикам. В этом случае феррицианид калия вызывает уширение сигнала спин-меченого цитохрома и, как следствие, снижение амплитуд компонентов спектра. Аналогичные изменения были отмечены при немицеллярных концентрациях неионного детергента эмульгена 913, активирующее действие которого на реакции гидроксилирования связано, как показано нами ранее, с присутствием его молекул в активном центре CYP2B4 одновременно с субстратами.