БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 4, с. 571–581
УДК 578.833.28:578.224
Характеристика C-концевой части гликопротеина Е вируса западного нила и оценка силы его взаимодействия с αVβ3 интегрином как с предполагаемым клеточным рецептором
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: вирус Западного Нила, гликопротеин Е, атомно-силовая микроскопия, αVβ3 интегрин.
Аннотация
Сконструирован рекомбинантный полипептид, содержащий эпитопы участка 260–466 аминокислотной последовательности гликопротеина Е вируса Западного Нила (ВЗН) (Е260–466) штамма LEIV-Vlg99-27889-human. Показано иммунохимическое сходство рекомбинантного полипептида Е260–466 и соответствующего участка белка Е ВЗН при помощи иммуноферментного анализа (ИФА), иммуноблоттинга, конкурентного ИФА, реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции нейтрализации с использованием поликлональных и моноклональных антител. Полипептид Е260–466 индуцировал образование вируснейтрализующих и перекрестно-реагирующих антител МКА, взаимодействующих с различными эпитопами этого рекомбинантного белка. Оценка взаимодействия Е260–466 с одним из предполагаемых клеточных рецепторов для ВЗН показала, что средняя сила специфического взаимодействия Е260–466 и αVβ3 интегрина, определенная при помощи атомно-силовой микроскопии, составила 80 и 140 пН для моно- и двойного взаимодействий, соответственно. Совокупность этих результатов и ранее опубликованных данных о взаимодействии домена II белка Е ВЗН с ламининсвязывающим белком (ЛСБ) позволила предположить, что гликопротеин Е ВЗН способен специфически взаимодействовать с двумя клеточными белками (ЛСБ и αVβ3 интегрин) в процессе проникновения в клетку.