БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 4, с. 549–557
УДК 577.152.1
Молекулярная характеристика и гетерологическая экспрессия гена хиннатдегидрогеназы из бактерий Gluconobacter oxydans IFO3244
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ген хиннатдегидрогеназы, гетерологическая генная экспрессия, Gluconobacter oxydans, пирролохинолинхинон.
Аннотация
Хиннатдегидрогеназа (ХДГ) из Gluconobacter oxydans IFO3244 характеризуется высоким сродством к хиннату, что позволяет предположить ее участие в продукции шикимовой кислоты клетками бактерий. Анализ последовательности гена qdh, кодирующего дегидрогеназу, выявил полинуклеотид длиной 2475 нуклеотидных пар (н.п.), кодирующий белок, содержащий 824 аминокислотных остатка (а.о.). Ген содержал необычный инициирующий трансляцию кодон ТТG. У белков семейства хиннопротеинов были обнаружены консервативные районы и характерные последовательности. Филогенетический анализ показал, что ХДГ из Gluconobacter oxydans родственна другим хиннат/шикиматдегидрогеназам, имеет высокую степень гомологии с ферментом из Acinetobacter calcoaceticus ADP1 (56%) и подобна (36% гомологии) мембрансвязанной глюкозодегидрогеназе (мГДГ) из E. сoli. Функциональность гена, кодирующего ХДГ, была подтверждена с помощью гетерологической генной экспрессии в клетках псевдомонад штамма Pseudomonas putida HK5, синтезирующих пирролохинолинхинон.