БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 3, с. 411–417
УДК 577.152.3
Влияние аминокислотной замены на биологическую активность пептидного ингибитора β-лактамазы
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: пептидный ингибитор β-лактамазы, β-лактамаза, аминокислотная замена, Klebsiella pneumoniae, константа ингибирования.
Аннотация
Амплифицирован ген β-лактамазы SHV, содержащийся в геномной ДНК бактерии Klebsiella pneumoniae штамма K-71, устойчивого к β-лактамам. Установлено, что очищенный рекомбинантный пептид P1 способен ингибировать гидролитическую активность β-лактамаз TEM-1 и SHV in vitro. Получены четыре мутантные формы пептида P1, содержащие три различные аминокислотные замены. Определены константы ингибирования для каждого из очищенных мутантных пептидов по отношению к лактамазам TEM-1 и SHV. Оказалось, что все изученные пептиды способны ингибировать активность обеих β-лактамаз, однако они обладают большим сродством к лактамазе TEM-1. Представленные данные свидетельствуют о том, что пептид P1-A обладает наибольшей ингибирующей активностью, в 3 раза превышающей активность оригинального пептида P1. Если пептид P1-A инкубировали с клетками K. pneumoniae K-71 в среде Лурия–Бертани, содержащей антибиотик ампициллин, наблюдаемая степень ингибирования роста клеток была более высокой, чем в случае пептида Р1. Предполагается, что этот пептид является перспективным кандидатом для проектирования новых ингибиторов β-лактамаз.