БИОХИМИЯ, 2010, том 75, вып. 2, с. 214–223
УДК 577.151
Взаимодействие Dnmt3a мыши с ДНК, содержащей О6-метилгуанин
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: О6-метилгуанин, ДНК-метилтранфераза мыши Dnmt3a, кооперативное связывание, непродуктивный комплекс.
Аннотация
О6-метилгуанин (O6meG) является одним из наиболее токсичных, мутагенных и канцерогенных поврежде- ний, возникающих при взаимодействии с ДНК некоторых продуктов катаболизма, а также метилирующих агентов, содержащихся в окружающей среде. Канцерогенное действие O6meG может быть обусловлено не только его мутагенными свойствами, но и изменением уровня ферментативного метилирования атома углерода С5 цитозина в CpG-последовательностях. В работе изучено влияние O6meG на функционирование каталитического домена ДНК-метилтрансферазы (МТазы) мыши Dnmt3a (Dnmt3a-CD). Связывание поврежденных ДНК-дуплексов с Dnmt3a-CD происходит кооперативно, и O6meG приводит к изменению стабильности фермент-субстратных комплексов. Кинетический анализ реакции метилирования выявил, что O6meG способствует изменению соотношения продуктивного и непродуктивного фермент-субстратных комплексов и в зависимости от локализации в субстрате приводит к снижению или увеличению степени метилирования ДНК. МТаза Dnmt3a-CD менее чувствительна к присутствию O6meG в ДНК-субстрате, чем прокариотическая CpG-узнающая МТаза M.SssI.