БИОХИМИЯ, 2009, том 74, вып. 12, с. 1650–1656

УДК 577.352.332 : 577.112.083

Бактериальный синтез, очистка и солюбилизация мембранного белка KCNE3 – регулятора потенциалзависимых калиевых каналов*

© 2009 С.А. Гончарук **, А.А. Шульга, Я.С. Ермолюк, П.К. Кузьмичев, В.А. Соболь, Э.В. Бочаров, В.В. Чупин, А.С. Арсеньев, М.П. Кирпичников

Институт биоорганической химии им. aкадемиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова

Поступила в редакцию 17.04.2009
После доработки 05.06.2009

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: KCNE (MiRP), мембранный белок, экспрессия, очистка, динамическое светорассеяние, ЯМР.

Аннотация

Описан эффективный способ получения мембранного белка KCNE3, а также его изотопно-меченых производных (15N-, 15N-/13C-) в количествах, достаточных для проведения структурно-функциональных исследований. Очищенный белковый препарат в составе мицелл различных детергентов охарактеризован методами динамического светорассеяния, КД- и ЯМР-спектроскопии. Показано, что в мицеллах DPC–LDAO белок находится в мономерной форме и принимает преимущественно α-спиральную конформацию. Наличие кросс-пиков от всех остатков глицина в 15N-HSQC-спектре ЯМР, а также относительно небольшая ширина сигналов (~20 Гц) подтверждают высокое качество полученного образца и возможность получения структурно-динамической информации о KCNE3 методом гетероядерной спектроскопии ЯМР высокого разрешения.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in press, BM09-124, 20.09.2009.

** Адресат для корреспонденции.