БИОХИМИЯ, 2009, том 74, вып. 12, с. 1622–1630

УДК 577.213.3

Характеристика физических взаимодействий между инициаторным белком репликации DnaA и репликативной хеликазой Mycobacterium tuberculosis H37Rv*

© 2009 Ю. Се, Ч. Хе **

National Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Center for Proteomics Research, College of Life Science and Technology, Huazhong Agricultural University

Поступила в редакцию 17.03.2009
После доработки 01.05.2009

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Mycobacterium tuberculosis, DnaB, точка начала репликации, DnaA, OriC.

Аннотация

В возбудителе туберкулеза Mycobacterium tuberculosis H37Rv генетический и биохимический механизмы инициации ДНК практически не изучены. В этом исследовании мы охарактеризовали физические взаимодействия между белками DnaA и DnaB M. tuberculosis, используя два подхода: in vivo такой, как бактериальный двугибридный метод, и in vitro такие техники, как поверхностный плазмонный резонанс (ППР) и выделение связыванием с последующей иммуноприципитацией на мембране. Обнаружено, что полноразмерный N-концевой домен белка DnaB (остатки 1–206) взаимодействует с DnaA, в то время как укороченный N-концевой домен DnaB (остатки 1–125), в котором отсутствует участок соединения (линкер), не взаимодействует. Дальнейшие исследования с помощью ППР и изменения электрофоретической подвижности в геле указывают на то, что N-концевой домен DnaB (остатки 1–206) также играет важную роль в регулировании формирования комплекса DnaA в точке начала репликации (OriC). Этот регуляторный эффект не наблюдается, если субстрат ДНК содержит лишь два участка для взаимодействия с DnaA. Впервые показано физическое взаимодействие между DnaA и репликативной хеликазой DnaB M. tuberculosis и роль в последующих взаимодействиях DnaA с OriC. Полученные данные позволяют понять регуляторные механизмы инициации репликации ДНК в этом микроорганизме, являющимся важным патогеном человека.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM09-089, 12.07.2009.

** Адресат для корреспонденции.