БИОХИМИЯ, 2009, том 74, вып. 9, с. 1260–1269
УДК 577.152.1; 151.4
Выделение и характеристика фермента, обладающего билирубиноксидазной и лакказной активностью, из мицелия базидиального гриба Pleurotus ostreatus
1 Международный государственный экологический университет им. А.Д. Сахарова
2 Department of Biochemistry, University of Nebraska
Поступила в редакцию 26.08.2008
После доработки 16.10.2008
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: мицелий, Pleurotus ostreatus, оксидоредуктаза, билирубиноксидаза, лакказа.
Аннотация
Из мицелия глубинного культивирования базидиомицета Pleurotus ostreatus выделен в гомогенном состоянии и охарактеризован фермент, проявляющий билирубиноксидазную и лакказную активности. Отмечено, что выход фермента составил 127 мкг на 1 г сухой биомассы мицелия, удельная активность фермента в реакции с билирубином – 21, а с лакказным субстратом АБТС – 261 E/мг. Установлено, что внутриклеточная фенолоксидаза из мицелия P. ostreatus является билирубиноксидазой и по аминокислотной поледовательности очень похожа на продукт, кодируемый геном рох2. Обнаружено, что максимальная лакказная активность выделенной билирубиноксидазы проявлялась при 50–55° и не зависела от окисляемого вещества, в то время как оптимум рН реакции окисления зависел от используемого субстрата и изменялся от 3,0 для АБТС до 7,0 для сирингальдазина и гваякола. Фермент сохранял каталитическую активность в широком диапазоне значений рН, но инактивировался при рН 4,0. Фермент термостабилен, но проявляет высокую чувствительность к металлхелатирующим ингибиторам. Полное обесцвечивание трипанового синего (5 мг/л) достигалось через 3 ч инкубации с 20 мЕ/мл билирубиноксидазы при комнатной температуре.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.