БИОХИМИЯ, 2009, том 74, вып. 4, с. 486–492

УДК 577.112

Наблюдение за путями сворачивания и разворачивания белка через изменения поверхностной гидрофобности с использованием флуоресцентной спектроскопии и спектроскопии кругового дихроизма*

© 2009 Я. Ламба 1, С. Пол 1,2, В. Хасиджа 1, Р. Аггарвал 1, Т.К. Шодхури 1**

Department of Biochemical Engineering and Biotechnology, Indian Institute of Technology Delhi

Department of Biotechnology and Medical Engineering, National Institute of Technology Rourkela

Поступила в редакцию 04.08.2008
После доработки 08.11.2008

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: гидрофобность поверхности, разворачивание белка, интермедиат сворачивания, флуоресцентная спектроскопия и спектроскопия кругового дихроизма, внешняя флуоресцентная спектроскопия.

Аннотация

При наблюдении за изменениями гидрофобности поверхности с использованием флуоресцентной спектроскопии и КД-спектроскопии были изучены характеристики процессов сворачивания и разворачивания двух модельных белков, овальбумина и α-лактальбумина. Замечено, что процесс разворачивания овальбумина и α-лактальбумина включает в себя три стадии, в том числе переходное состояние с высокой гидрофобностью поверхности. Переходное состояние также охарактеризовано с помощью спектроскопических методов. Обнаружено, что в переходном состоянии сохраняется практически та же вторичная структура, что и в нативном белке, вследствие чего данное состояние можно соотнести с расплавленной глобулой. С использованием тех же методов проведено исследование процесса рефолдинга. Показано, что рефолдинг α-лактальбумина обратим и происходит через образование сходного типа интермедиатов, что и в процессе разворачивания. Однако при рефолдингеиз денатурированного состояния, полученного с помощью гидрохлорида гуанидина, овальбумин приходит к другому свернутому состоянию.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM08-252, 18.01.2009.

** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.ц