БИОХИМИЯ, 2009, том 74, вып. 4, с. 459–465

УДК 577.121.7

Особенности энергетики митохондрий в живом одноклеточном эукариоте Tetrahymena pyriformis, модели для изучения внутриклеточной адаптации у млекопитающих

© 2009 Е.А. Приходько 1,2, И.В. Брайловская 3, С.М. Коротков 3, Е.Н. Мохова 1*

НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова

Факультет биоинженерии и биоинформатики МГУ им. М.В. Ломоносова

Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН

Поступила в редакцию 26.10.2008
После доработки 22.12.2008

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ATP/ADP-антипортер; мембранный потенциал; митохондрии, Tetrahymena pyriformis, разобщители, ДНФ, внутриклеточная адаптация.

Аннотация

Клетки Tetrahymena pyriformis часто используют в разнообразных исследованиях вместо клеток млекопитающих, поскольку они похожи по ряду основных метаболических циклов. Однако в живых инфузориях не были изучены основные характеристики энергетики митохондрий этих клеток, например такие как ∆ψ (трансмембранная разность электрических потенциалов на внутренней мембране митохондрий) и максимальная стимуляция дыхания разобщителями с разным механизмом действия, такими как ДНФ (2,4-динитрофенол) и ФКФ (n-трифторометокси­карбонилцианид­фенилгидразон), до сих пор не изучены. В настоящей работе использовали отмытые от субстратов окисления клетки T. pyriformis GL в стационарной фазе роста. Максимальная стимуляция дыхания клеток ФКФ была примерно шестикратной, что свидетельствует о высокой протондвижущей силе. ДНФ значительно слабее стимулировал дыхание. Это указывает на низкую активность ATP/ADP-антипортера, который участвует не только в обмене внутримитохондриального АТР на внемитохондриальный ADP, но и в процессе разобщения; он помогает сходным путем электрофоретическому транспорту из матрикса митохондрий в цитозоль АТР4– и аниону ДНФ, но не аниону ФКФ. В таком случае, в отличие от митохондрий млекопитающих, митохондрии T. pyriformis не могут быстро транспортировать АТР в цитозоль; возможно, для клетки важна высокая концентрация внутримитохондриального АТР. Предполагается, что различие между разобщающим действием ДНФ и ФКФ обусловлено низкой величиной ∆ψ и/или увеличением концентрации длинноцепочечных ацил-КоА, ингибиторов ATP/ADP-антипортера. Первое предположение подтверждается тем, что в окрашенных митотрекером красным двигающихся и остановившихся клетках T. pyriformis не удалось обнаружить митохондрий с яркой флуоресценцией этого ∆ψ-чувствительного зонда. Эти и другие данные указывают, что в подобранных условиях эксперимента T. pyriformis – подходящий объект для изучения роли митохондрий в адаптации на внутриклеточном уровне.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.