БИОХИМИЯ, 2009, том 74, вып. 1, с. 108–116

УДК 577.113.4

SsoII-подобная ДНК-метилтрансфераза Eсl18kI: взаимосвязь между регуляторной и метилирующей функциями*

© 2009 Е.А. Федотова 1, А.С. Проценко 2,3, М.В. Захарова 3, Н.В. Лаврова 4, А.В. Алексеевский 5, Т.С. Орецкая 1, А.С. Карягина 4, А.С. Солонин 3, Е.А. Кубарева 5**

1 Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова

2 Пущинский государственный университет

3 Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина

4 Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН

5 НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова

Поступила в редакцию 29.05.2008
После доработки 23.06.2008

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: регуляция в системах рестрикции−модификации, С5-цитозиновая ДНК-метилтрансфераза, ДНК-белковые взаимодействия.

Аннотация

Исследовано взаимодействие ДНК-метилтрансферазы Ecl18kI (M.Ecl18kI) с фрагментом промоторной области системы рестрикции−модификации SsoII. Показано, что константы диссоциации комплексов М.Ecl18kI и М.SsoII с ДНК-лигандом, содержащим регуляторный участок, охарактеризованный ранее для М.SsoII, имеют сравнимые значения. Получено делеционное производное M.Ecl18kI – Δ(72−379)Ecl18kI, представляющее собой N-концевую область белка, ответственную за регуляцию. Показано, что такой полипептидный фрагмент практически не связывается с регуляторным участком. Следовательно, наличие области, ответственной за метилирование, необходимо для поддержания регуляторной функции M.Ecl18kI. Изучены свойства метилтрансферазы NlaX, по существу являющейся природным делеционным производным M.Ecl18kI и М.SsoII, лишенным первых 70 аминокислотных остатков и не способным регулировать экспрессию генов системы рестрикции–модификации SsoII. Охарактеризована способность мутантных форм M.Ecl18kI, содержащих единичные аминокислотные замены в областях, ответственных за регуляцию и метилирование, взаимодействовать с обоими участками узнавания ДНК. Полученные результаты свидетельствуют о взаимозависимости ДНК-связывающей активности двух областей М.Ecl18kI − регуляторной и метилирующей.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM08-185, 14.12.2009.

** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.