БИОХИМИЯ, 2008, том 73, вып. 11, с. 1513–1523
УДК 577.218
Клонирование и идентификация функции двух новых вариантов сплайсинга BRCA1*
1 State Key Laboratory of Virology, College of Life Sciences, Wuhan University
2 Department of Biochemistry and Molecular Biology, School of Medicine, Wuhan University
3 Center for Type Culture Collection, Wuhan University
Поступила в редакцию 14.01.2008
После доработки 20.05.2008
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: рак груди, BRCA1, альтернативный сплайсинг, внутриклеточная локализация, апоптоз.
Аннотация
Клонированы два новых варианта сплайсинга гена BRCA1 из клеточной линии рака груди ZR-75-30. Установлено, что в продуктах транскрипции, названных BRCA1-PI21-Δ2–21 и BRCA1-Δ2–14, отсутствовало большинство экзонов полноразмерного гена BRCA1, но сохранилась изначальная рамка считывания. Продемонстрировано наличие BRCA1-PI21-Δ2–21 в нескольких клеточных линиях, полученных от человека. Белковые продукты двух вариантов сплайсинга гена BRCA1, модифицированные присоединением зеленого флуоресцирующего белка (ЗФБ), направляются в различные зоны трансфицированных клеток. Отмечено, что жизнеспособность клеток, экспрессирующих любой из модифицированных белков, заметно уменьшалась по сравнению с жизнеспособностью клеток, экспрессирующих только ЗФБ. Методом проточной флуороцитометрии подтверждено, что сверхэкспрессия обоих вариантов сплайсинга приводила к апоптозу клеток. Различие внутриклеточной локализации и воздействия на клетки позволяет предположить, что два продукта сплайсинга выполняют разные биологические функции в раковых клетках. Выяснение функций продуктов сплайсинга BRCA1 окажет помощь в понимании роли гена BRCA1 в подавлении опухолей.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, ВМ08-005, 06.07.2008.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.