БИОХИМИЯ, 2008, том 73, вып. 8, с. 1114–1123

УДК 577.152.361

Двойная роль металлов-кофакторов в неорганической пирофосфатазе Micobacterium tuberculosis*

© 2008 Е.В. Родина 1,2**, Л.П. Вайнонен 1, Н.Н. Воробьева 1, С.А. Курилова 2, Т.С. Ситник 2, Т.И. Назарова 2

1 Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова

2 Институт физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского, МГУ им. М.В. Ломоносова

Поступила в редакцию 25.12.2007
После доработки 24.01.2008

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: пирофосфатаза, M. tuberculosis, Mg2+, Mn2+, металл-кофактор, кофакторная специфичность.

Аннотация

Растворимая неорганическая пирофосфатаза из Mycobacterium tuberculosis (Mt-РРаза) является одной из потенциальных мишеней для разработки антитуберкулезных препаратов. Охарактеризованы особенности функционирования этого фермента в присутствии двух наиболее эффективных металлов-активаторов, Mg2+ и Mn2+. Показано, что Кd комплексов Mt-РРазы с Mg2+ и Mn2+ существенно не изменились по сравнению с ферментом из E. coli. Охарактеризовано влияние рН, Mg2+ и Mn2+ на стабильность гексамера Mt-РРазы. Установлено, что апоформа гексамерной Mt-РРазы при рН ниже 4,0 кооперативно диссоциирует с образованием мономеров, а при рН 8–10 – с образованием тримеров. Показано, что ионы Mg2+ или Mn2+ играют стабилизирующую роль и сдвигают равновесие тример–гексамер, характерное для апофермента Mt-РРазы при рН 8–10, в сторону гексамера. Определены значения рКа групп, контролирующих переходы гексамер–мономер, гексамер–тример и тример–мономер. Сделан вывод, что наличие неконсервативных остатков His21 и His86 в активном центре Mt-РРазы приводит к отсутствию зависимости субстратной специфичности этого фермента от природы металла-кофактора, характерной для других РРаз.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in press, BM07-434, 18.05.2008.

** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.