Влияние электростатического притяжения между цитохромом bc₁ и цитохромом c на кинетику восстановления цитохрома c^*

Аннотация

Изучали кинетику убихинол : цитохром c-редуктазной реакции (QCR), катализируемой мембранными фрагментами и очищенными bc₁-комплексами, полученными из штаммов дикого типа (WT) и штаммов недавно сконструированных мутантов (MUT) Paracoccus denitrificans. Цитохром c1 WT обладал дополнительным участком кислых аминокислот, отсутствующим у мутанта. Для этой реакции, которую исследовали в присутствии положительно заряженных митохондриальных и отрицательно заряженных бактериальных цитохромов c, проведено сравнение величин специфической активности, кажущейся k_cat и константы скорости первого порядка. Для фракций MUT эти величины были заметно ниже при использовании митохондриального цитохрома c, но слабо различались для бактериального цитохрома c. Установлено, что препараты MUT менее чувствительны к изменениям ионной силы реакционной среды и демонстрируют строгую кинетику первого порядка для обоих образцов цитохрома c. Показано, что реакция фермента WT подчиняется первому порядку только при участии бактериального цитохрома c, но протекает нелинейно с митохондриальным цитохромом c. Реакция характеризовалась быстрым начальным участком, сменявшимся постепенным падением скорости. Эксперименты, проведенные в отсутствие донора электрона, показали, что электростатическое притяжение может принимать непосредственное участие в восстановлении цитохрома c.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: