Клонирование и исследование функции нуклеозиддифосфокиназы морского гребешка Chlamys farreri

Аннотация

Нуклеозиддифосфаткиназа (NDPK) – ключевой фермент метаболизма, катализирующий синтез неадениновых нуклеозидтрифосфатов (NTP) путем переноса концевой фосфатной группы с молекулы NTP на нуклеозиддифосфат (NDP). NDPK регулирует многочисленные процессы в клетках эукариот, включая пролиферацию, рост и дифференцировку клеток. кДНК Гена ndpk получена из гемоцитов морского гребешка Chlamys farreri. Показано, что полноразмерная последовательность Cf-ndpk содержит 715 н.п. и кодирует полипептид из 153 аминокислот с молекулярной массой 16927,52 Да и pI 7,64. Методами нозерн-блоттинга и гибридизации in situ исследована экспрессия мРНК и распределение Cf-ndpk в клетках нормальных и зараженных бактериями морских гребешков. Показано, что транскрипты Cf-ndpk присутствуют в гемоцитах, гребне, замыкающей мышце, мантии, пищеварительных железах, ноге и половых железах морских гребешков, причем уровень транскрипции в гемоцитах возрастает после заражения бактериями. Установлено, что рекомбинантная Cf-NDPK, экспрессируемая в клетках E. coli, способна катализировать перенос концевой фосфатной группы с ATP на UDP. Cf-NDPK обнаружена во всех исследованных тканях, включая ногу, замыкающую мышцу, пищеварительные железы, половые железы, мантию, гребень и гемолимфу. Показано, что синтез фермента гемолимфы активируется после заражения бактериями. На основании полученных данных высказано предположение, что NDPK может участвовать в реакциях врожденного иммунитета морского гребешка.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: