Новые ДНК-гликозилазы из Mycobacterium tuberculosis^*

Аннотация

В удалении окисленных оснований из ДНК Escherichia coli участвуют два фермента, формамидопиримидин-ДНК-гликозилаза (Eco-Fpg) и эндонуклеаза VIII (Eco-Nei), принадлежащие к одному структурному семейству Fpg/Nei. В геноме актиномицетов обнаружены несколько гомологов этих ферментов, до настоящего времени не охарактеризованные. Были клонированы и экспрессированы два паралога (Mtu-Nei2 и Mtu-Fpg2) из изолятов 36KAZ и KHA94 Mycobacterium tuberculosis и исследована их способность участвовать в репарации ДНК. Показано, что при гетерологичной экспрессии в E. coli Mtu-Nei2 понижал частоту спонтанных мутаций в гене rpoB, в то время как Mtu-Fpg2 умеренно повышал ее, что может быть связано с отсутствием в этом белке остатков, критически важных для катализа. Mtu-Nei2 проявлял высокую активность по отношению к двухцепочечным ДНК-субстратам, содержащим остатки дигидроурацила и апурин-апиримидиновые сайты, а также был способен с меньшей эффективностью расщеплять субстраты, содержащие остатки 8-оксогуанина и урацила. Эти повреждения, а также остатки 8-оксоаденина, узнавались и удалялись ферментом из одноцепочечной ДНК. Гомологи Fpg и Nei из M. tuberculosis могут играть важную роль в защите бактерий от генотоксического стресса, вызванного окислительным взрывом в макрофагах.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: