Фосфорилирование сАМР-зависимой протеинкиназой влияет на структуру и ингибирует шапероноподобную активность малого белка теплового шока Hsp22 человека^*

Аннотация

Малый белок теплового шока человека с молекулярной массой 22 кДа (Hsp22, HspB8) содержит в своей структуре два остатка серина (Ser24, Ser57), входящих в состав консенсусной последовательности RXS, узнаваемой и фосфорилируемой сАМР-зависимой протеинкиназой. Показано, что в условиях in vitro Hsp22 эффективно фосфорилируется сАМР-зависимой протеинкиназой, которая переносит около моля фосфата на моль белка. Продемонстрировано, что точечная мутация S24D не влияет, а точечные мутации S57D или S24,57D предотвращают фосфорилирование Hsp22, что свидетельствует о том, что Ser57 является участком, преимущественно фосфорилируемым сАМР-зависимой протеинкиназой. Фосфорилирование (или мутации) Ser57 и/или Ser24 приводит к изменению окружения остатков триптофана и увеличению чувствительности Hsp22 к химотрипсинолизу. Мутации, имитирующие фосфорилирование, уменьшают вероятность диссоциации малых олигомеров Hsp22 при малых концентрациях белка и не влияют на четвертичную структуру при высокой концентрации белка. Мутации S24D, S57D и особенно S24,57D уменьшают шапероноподобную активность Hsp22 при использовании инсулина или роданазы в качестве модельных субстратов. Таким образом, установлено, что фосфорилирование (или мутации, имитирующие фосфорилирование) остатков серина, расположенных в N-концевой части, влияет на структуру и сопровождается уменьшением шапероноподобной активности Hsp22.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: