Исследование глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы из сперматозоидов человека^*

Аннотация

Из сперматозоидов человека выделена глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (ГАФДс) и определены свойства фермента. Показано, что после обработки сперматозоидов ультразвуком большая часть ГАФДс остается связанной с нерастворимой фракцией. Обработка сперматозоидов трипсином приводит к отщеплению части N-концевого домена ГАФДс с образованием растворимого фрагмента, который был очищен методом гидрофобной хроматографии на фенил-сефарозе. Определено, что выделенный фрагмент ГАФДс – тетрамер с молекулярной массой ~150 кДа (по данным нативного электрофореза в присутствии Кумасси G-250) и образован субъединицами с молекулярной массой 40 кДа (по данным Ds-Na-электрофореза). Измерена удельная активность выделенного фрагмента ГАФДс, которая достигает 374 ед/мг. Высказано предположение, что ГАФДс присутствует в сперматозоидах в виде тетрамера, который связан с фиброзным слоем жгутика через N-концевой домен одной (двух) субъединиц. С использованием сравнительного анализа первичной структуры ГАФДс млекопитающих выявлены консервативные цистеиновые остатки С21, С94 и С150, характерные для сперматозоидной изоформы фермента и отсутствующие у соматической изоформы. Остаток С21 может принимать участие в образовании дисульфидной связи между N-концевым доменом ГАФДс и белками фиброзного слоя.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: