БИОХИМИЯ, 2008, том 73, вып. 2, с. 154–161
УДК 577.151.3
Сайт-направленный мутагенез консервативных остатков цистеина в субъединицах NqrD и NqrE Na+-транслоцирующей NADH : хинон-оксидоредуктазы*,**
1 НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова
2 Факультет биоинформатики и биоинженерии МГУ им. М.В. Ломоносова
3 Helsinki Bioenergetics Group, Institute of Biotechnology
Поступила в редакцию 06.09.2007
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Na+-транслоцирующая NADH : хинон-оксидоредуктаза, натриевый потенциал, Vibrio.
Аннотация
Показано, что субъединицы NqrD и NqrE Na+-транслоцирующей NADH : хинон-оксидоредуктазы (NQR) содержат по два абсолютно консервативных остатка цистеина внутри трансмембранных α-спиралей. С помощью сайт-направленного мутагенеза проведены замены этих консервативных остатков в NQR из Vibrio harveyi и установлено, что данные замены приводят к нарушению Na+-зависимой и 2-н-гептил-4-гидроксихинолин N-оксид-чувствительной хинон-редуктазной активности фермента, не затрагивая его способности к взаимодействию с NADH и менадионом. Также выявлено, что консервативные остатки цистеина в субъединицах NqrD и NqrE необходимы для правильной сборки и (или) стабильности NQR-комплекса. С помощью масс- и ЭПР-спектрометрического анализа установлено, что NQR из V. harveyi содержит лишь одну металлсодержащую простетическую группу – [2Fe-2S]-кластер.
Текст статьи
Сноски
* Ускоренная публикация.
** Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM07-30, 16.12.2007.
*** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.