Взаимодействие хинолоксидазы типа bd из Escherichia coli и окиси углерода: гем d связывает CO с высоким сродством^*,**

Аннотация

Проведено сравнительное изучение взаимодействия мембранной и солюбилизированной форм цитохрома bd в полностью восстановленном состоянии с окисью углерода при комнатной температуре. Отмечено, что CO вызывает длинноволновый сдвиг полосы гема d с максимумом при 644 нм и минимумом при 624 нм и появление пика при 540 нм. Установлено, что в полосе Соре связывание CO с цитохромом bd приводит к уменьшению поглощения и появлению минимумов при 430 и 445 нм. Обнаружено, что изменения поглощения в полосе Соре и при 540 нм происходят параллельно с таковыми при 630 нм и достигают насыщения при 3–5 мкМ CO. Предполагается, что пик при 540 нм является β-полосой комплекса гема d с CO либо частью его расщепленной α-полосы. Показано, что в обеих формах цитохрома bd CO реагирует преимущественно с гемом d, а добавление к солюбилизированому цитохрому bd CO в высоких концентрациях приводит к дополнительным спектральным изменениям в γ-полосе, свидетельствующим о связывании лиганда с 10–15% низкоспинового гема b₅₅₈. Установлено, что высокоспиновый гем b₅₉₅ не связывает CO даже при высоких концентрациях лиганда. Отмечено, что кажущиеся константы диссоциации комплекса CO с гемом d мембранной и солюбилизированной форм полностью восстановленного фермента составляют ~70 и 80 нМ соответственно.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: