БИОХИМИЯ, 2007, том 72, вып. 11, с. 1495–1505
УДК 577.354
Профилирование белков рецепторного комплекса молекулы CD4*
1 Государственный научный центр «Институт иммунологии Федерального медико-биологического агентства России»
2 ГУ НИИ биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН
Поступила в редакцию 23.05.2007
После доработки 03.07.2007
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: белковые комплексы, неионные детергенты, иммунопреципитация, масс-спектрометрия, CD4.
Аннотация
Изучены межмолекулярные комплексы, образуемые молекулой CD4. Для сохранения целостности слабых белок-белковых взаимодействий антигена CD4 использован лизис клеток в мягком детергенте Brij97. Белки, входящие в данный комплекс, идентифицированы с помощью предложенного нами ранее метода флуоресцентной иммунопреципитации и последующего масс-спектрометрического анализа. В общей сложности на клетках линии CEM идентифицировано 26 белков, ассоциированных с СD4. Установлено, что основные компоненты CD4-комплекса – тирозинфосфатаза CD45, рецептор трансферрина CD71, тирозинкиназа Lck и лимфоцитарный фосфатазоассоциированный белок LPAP. В CD4-комплекс также входили некоторые компоненты цитоскелета и белки теплового шока. Ассоциация между молекулами CD4, CD71 и CD45 подтверждена результатами иммуноблоттинга. Комплексы молекулы CD4 не были обнаружены на клетках миелоидной линии U937, в которых отсутствуют Lck и LPAP. Предпринята попытка количественной оценки состава CD4-комплекса.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM07-158, 07.10.2007.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.