БИОХИМИЯ, 2007, том 72, вып. 9, с. 1182–1188
УДК 577.152
Тушение флуоресценции Tyr и Trp люциферазы светляков Luciola mingrelica субстратами*
Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 17.04.2007
После доработки 17.05.2007
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: люцифераза светляков, биолюминесценция, флуоресценция Tyr, флуоресценция Trp, люциферин, АТР, АМР.
Аннотация
Показано, что для люциферазы светляков Luciola mingrelica характерна флуоресценция не только единственного остатка Trp, но и остатков Tyr. Изучено тушение собственной флуоресценции люциферазы при образовании комплекса с субстратами (люциферином и АТР (АМР)). Найдено, что люциферин (LH2) более эффективно тушит флуоресценцию остатка Trp, чем остатков Tyr. Обнаружены два центра тушения АТР флуоресценции остатков Tyr, по-видимому соответствующие аллостерическому и активному центрам люциферазы с Ks(АТР) = 20 и 110 мкМ соответственно. Флуоресцентным методом исследовано влияние одного субстрата на сродство люциферазы ко второму субстрату. Показано, что основное влияние на сродство люциферазы к LH2 оказывает присоединение АТР (АМР) к аллостерическим центрам люциферазы. Отмечено, что образование комплекса люциферазы с LH2 приводит к изменению сродства как аллостерических, так и активного центров люциферазы к АТР (АМР). Эти эффекты, вероятно, связаны с конформационными изменениями в молекуле люциферазы при взаимодействии с каждым субстратом.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM07-108, 19.08.2007.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.