Белок, связывание которого с Na,K-ATPазой регулируется уабаином^*

Аннотация

Иммунопреципитация Na,K-ATPазы из гомогената почек с использованием антител против α1-субъединицы приводит к осаждению вместе с Na,K-ATPазой нескольких взаимодействующих с ней белков. При проведении иммунопреципитации в среде с уабаином в иммунопреципитате обнаруживается белок с молекулярной массой 67 кДа, взаимодействующий с антителами против мелиттина (мелиттинподобный белок, MLP). Если иммунопреципитация проводится с использованием антител против мелиттина, то в иммунопреципитате обнаруживается MLP и α1-субъединица Na,K-AТРазы, количество которой возрастает при добавлении уабаина. MLP выделен из гомогената почек мыши методом иммуноаффинной хроматографии с использованием антител против мелиттина. Добавление MLP к очищенной Na,K-AТРазе, меченной ФИТЦ, уменьшает интенсивность флуоресценции в среде с К⁺ и увеличивает ее в среде с Na⁺, причем рост интенсивности флуоресценции зависит от концентрации MLP. N-концевая последовательность MLP имеет следующий вид: HPPKRVRSRLNG. В базах данных не обнаружено белков с такой N-концевой последовательностью. Однако выявлено пять аминокислотных последовательностей, которые содержат этот пептид в середине цепи на расстоянии 553 аминокислоты от C-конца (что примерно соответствует молекулярной массе 67 кДа). Анализ участка, расположенного между C-концом и пептидом HPPKRVRSRLNG во всех обнаруженных последовательностях, показал, что они высоко консервативны и содержат WD40-повторы. Предполагается, что MLP либо принадлежит к обнаруженному семейству белков, либо является продуктом протеолиза одного из них.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: