Исследование химерных и TAG-форм рекомбинантных нуклеозиддифосфаткиназ α и β крысы. Взаимодействие с родопсин-трансдуциновым комплексом и температурная стабильность^*

Аннотация

В целях выяснения физико-химических основ различий между изоформами мультифункциональной нуклеозид­дифосфаткиназы (NDP-киназа) млекопитающих исследовали рекомбинантные гомогексамерные α и β изоформы NDP-киназы крысы, состоящие из высокогомологичных субъединиц α или β длиной по 152 аминокислотных остатка и отличающиеся лишь вариабельными областями V1 и V2, а также их химерные формы (NDP-киназа α^1–130β^131–152 и NDP-киназа β^1–130α^131–152) и tag-производные (NDP-киназа HA-α^1–130β^131–152, NDP-киназа HA-β^1–130α^131–152 и NDP-киназа HA-β). Проведено изучение термостабильности этих белков и способности некоторых из них к взаимодействию с комплексом родопсин–трансдуцин (комплекс R*Gt). Обнаружено, что NDP-киназа α, NDP-киназа α^1–130β^131–152 и NDP-киназа HA-α^1–130β^131–152 подобны по своей термостабильности. NDP-киназа β, NDP-киназа β^1–130α^131–152, NDP-киназа HA-β^1–130α^131–152 и NDP-киназа HA-β инактивировались при более низких температурах. Показано, что NDP-киназа HA-α^1–130β^131–152 взаимодействует с комплексом R*Gt подобно NDP-киназе α, тогда как взаимодействие NDP-киназы HA-β^1–130α^131–152 и NDP-киназы β с этим комплексом было очень слабым. Выдвинуто предположение, что вариабельность участка V1 – структурная основа мультифункциональности гексамеров NDP-киназы в клетках млекопитающих.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: