Получение функционально активного рекомбинантного интерлейкина-6 человека

1 НИИ физико-химической биологии МГУ им. М.В. Ломоносова

2 Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова

3 ГУ Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН

Поступила в редакцию 10.10.2006
После доработки 08.12.2006

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: интерлейкин-6, клонирование, высокоактивный белок, ELISA, димеризация рецептора gp130.

Аннотация

Клонирован ген интерлейкина-6 (hIL-6) человека с 20 дополнительными аминокислотами на N-конце, включая шесть остатков гистидина, в экспрессионную плазмиду рET28b+. Отработаны условия получения высокоактивного белка как с использованием денатурирующих агентов, так и в неденатурирующих условиях. Использование предложенной нами системы диализов позволило получать функционально активный hIL-6 с чистотой 90–95% и выходом 3 мг/л культуры клеток. С помощью метода ELISA установлено, что наиболее активен препарат, который был выделен без использования денатурирующих агентов. Изучена функциональная активность hIL-6 методом проточной цитофлуориметрии. Показано, что добавление hIL-6 к клеткам иммортализованных линий множественной миеломы человека приводит к димеризации молекулы рецептора gp130.

Текст статьи

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.