БИОХИМИЯ, 2007, том 72, вып. 3, с. 375–382
УДК 577.27
Дополнительная стабилизация стволового бромелаина, связанного с термочувствительным полимером, за счет равномерной ориентации и взаимодействия с поликлональными антителами
1 Interdisciplinary Biotechnology Unit, Aligarh Muslim University
2 Department of Biochemistry, Aligarh Muslim University
Поступила в редакцию 15.09.2006
После доработки 08.12.2006
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: поли(N-изопропилакриламид), бромелаин, термочувствительный полимер, иммобилизация с пространственной ориентацией.
Аннотация
Стволовой бромелаин ковалентно сшивали с термочувствительным полимером p(NIPAm) путем связывания с аминогруппой фермента (неупорядоченное связывание) или с отдельной олигосахаридной цепочкой (упорядоченное связывание). Установлено, что фермент, связанный через олигосахаридную цепочку, обладал лучшим связыванием с субстратом казеином по сравнению с ферментом, связанным через аминогруппы. Показано, что при 35° иммобилизованный фермент обладал более широким pH-профилем активности и характеризовался смещением оптимума активности с 8,0 (для нативного) до 10,0. При 25° смещение оптимума активности наблюдалось лишь для фермента, связанного через аминогруппы. Профиль активности иммобилизованного фермента в зависимости от температуры был шире профиля активности нативного фермента. Более того, максимум активности иммобилизованного фермента смещался в сторону повышения температуры. Обнаружено, что максимум активности фермента, иммобилизованного через олигосахаридную цепочку, находился при температуре 70°. Отмечено, что скорости инактивации бромелаина, связанного с полимером, при 60° были ниже скоростей инактивации нативного фермента. Проведено сравнение продуктов расщепления гемоглобина и иммуноглобулина нативным и иммобилизованным бромелаином.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.