Сравнительное изучение топогенеза цитохрома P450scc (CYP11A1) и его гибридов с адренодоксином при экспрессии в клетках Escherichia coli

Аннотация

В клетках E. coli осуществлена экспрессия гибридных белков, включающих аминокислотную последовательность зрелой формы цитохрома P450scc (mP) и последовательность адренодоксина (Ad) на ее NH₂– или COOH-концах (Ad-mP и mP-Ad). Спектральные и каталитические свойства вариантов P450scc изучены в препаратах мембранной фракции клеток E. coli. Показано, что наличие дополнительных аминокислотных последовательностей на концах P450scc не влияет на включение гибридных белков в цитоплазматическую мембрану и на эффективность связывания гема. Слияние последовательности адренодоксина с NH₂– концом P450scc не влияет существенно на процесс сворачивания домена P450scc, однако приводит к значительному снижению удельной холестерингидроксилазной/лиазной активности фермента. Аналогичная модификация COOH-конца не приводит к изменению удельной активности P450scc, но приводит к существенному увеличению доли гибридного белка с неправильно свернутым доменом P450scc.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: