Сериновая тиолзависимая протеиназа Paecilomyces lilacinus: выделение и свойства

Аннотация

Внеклеточная сериновая тиолзависимая протеиназа выделена из культуральной жидкости микроскопического гриба Paecilomyces lilacinus с выходом 33%. Показано, что фермент ингибируется фенилметилсульфонилфторидом, а также п-хлорoмеркуриoбензоатом и ацетатом ртути, но устойчив к действию хелатирующих соединений. Обнаружено, что протеиназа обладает широкой специфичностью, гидролизует белки и п-нитроанилиды N-ацилированных трипептидов, проявляя максимальную активность по гидролизу субстратов, содержащих в положении Р1 протяженные гидрофобные и ароматические остатки (норлейцин, лейцин, фенилаланин), а также аргинин. Установлено, что молекулярная масса протеиназы P. lilacinus составляет 33 кДа. Показано, что фермент наиболее активен в щелочном диапазоне рН (10–11,5), протеиназа термостабильна, характеризуется широким температурным оптимумом действия (30–60°), при этом эффективно гидролизует субстраты при 0°, проявляя ~25% максимальной активности. Отчетливой гомологии между определенной N-концевой последовательностью протеиназы P. lilacinus (Gly-Ala-Thr-Thr-Gln-Gly-Ala-Thr-Gly/Ile-Xxx-Gly) и известными первичными структурами сериновых протеиназ грибного и бациллярного происхождения не выявлено. По своим физико-химическим и энзиматическим свойствам выделенный фермент может быть отнесен к тиолзависимым субтилизинам.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: