БИОХИМИЯ, 2006, том 71, вып. 11, с. 1451–1458

УДК 577.152.34.02

Гетерологичная экспрессия, очистка и свойства белка-ингибитора сериновых протеиназ из картофеля*,**

© 2006 А.С. Сперанская 1, А.А. Криницына 2, Т.А. Ревина 1, Н.Г. Герасимова 1, Я.С. Керученько 1, А.Б. Шевелев 1, Т.А. Валуева 1***

1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

2 Биологический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова

Поступила в редакцию 13.06.2006

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ингибиторы протеиназ типа Кунитца, сериновые протеиназы, картофель, гетерологичная экспрессия.

Аннотация

Ген PKPI-B10 [AF536175], кодирующий в картофеле (Solanum tuberosum L., сорт Истринский) белок-ингибитор протеиназ типа Кунитца клонирован в вектор pET23a и затем экспрессирован в Escherichia coli. Рекомбинантный белок PKPI-B10, полученный в виде телец включения, денатурирован, отделен от примесей методом высокоэффективной ионообменной хроматографии (FPLC) на колонке Mono Q в денатурирующих условиях и ренатурирован. Нативный белок был дополнительно очищен с помощью ионообменной FPLC-хроматографии на ДЭАЭ-Toyopearl. Белок PKPI-B10 эффективно подавлял активность трипсина, значительно слабее ингибировал химотрипсин и не действовал на другие исследованные сериновые протеиназы: эластазу из лейкоцитов человека, субтилизин Карлсберг и протеиназу К, а также на растительную цистеиновую протеиназу, папаин.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Ускоренная публикация.

** Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM06-156, 24.09.2006.

*** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.