Сравнительное изучение влияния полиолов, солей и спиртов на конформационное состояние цитохрома c, стимулированное трихлоруксусной кислотой^*

Аннотация

С помощью различных спектроскопических методов проведено систематическое изучение влияния полиэтиленгликолей, солей и спиртов на конформационное состояние феррицитохрома c, стимулированное трихлоруксусной кислотой (ТХУ). В спектре флуоресценции нативного цитохрома c имеется максимум при 335 нм, в то время как у ТХУ-стимулированной конформации цитохрома c этот максимум сдвинут на 7 нм в длинноволновую область, и интенсивность его возрастает. Спектры КД в ближней и дальней УФ-областях показывают, что третичная и вторичная структура белка в значительной степени утрачены, хотя по сравнению с конформацией при pH 2,0 белок относительно мало раскручен. Добавление 70% (по объему) растворов полиолов к цитохрому c с ТХУ (3,3 мМ)-стимулированной конформацией приводит к увеличению связывания 1-анилино-8-нафталинсульфоната (АНС) и росту средней эллиптичности аминокислотных остатков (СЭО) при 222 нм, что указывает на большую компактность при увеличении экспозиции гидрофобной поверхности. Стабилизирующее влияние солей и спиртов на ТХУ-стимулированную конформацию цитохрома c также изучено и сопоставлено с их влиянием на конформацию цитохрома c, раскрученного под действием трифторуксусной кислоты (ТФУ). По результатам вышеперечисленных методов, среди исследованных полиолов, солей и спиртов, наибольшее влияние на вторичную структуру ТХУ-стимулированной конформации цитохрома c оказывали ПЭГ-400, K₃[Fe(CN)₆] и бутанол. Что касается солей, то их эффект на вторичную структуру белка уменьшается в ряду K₃[Fe(CN)₆] > KClO₄ > K₂SO₄ > KCl. Для спиртов аналогичный ряд выглядел следующим образом: бутанол > пропанол > этанол > метанол.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: