Роль C-концевой последовательности цитохрома Р450scc в фолдинге и функциональной активности^*

Аннотация

Для выяснения роли остатка Arg472 и C-концевой последовательности зрелой формы холестерингидроксилирующего цитохрома Р450sсс, относящегося к группе митохондриальных цитохромов Р450, в настоящей работе осуществлено последовательное удаление C-концевых аминокислотных остатков гемопротеида и оценена их роль в фолдинге и катализе. Отмечено, что удаление 1−9 аминокислотных остатков (∆9-цитохром Р450scc) значительно не сказывается на физико-химических свойствах транкированных форм цитохрома Р450scc, но сопровождается резким увеличением экспрессии рекомбинантного гемопротеида (∆4-цитохром Р450scc) в Escherichia coli. Удаление же 10 C-концевых аминокислотных остатков (∆10-цитохром Р450scc) зрелой формы цитохрома Р450scc (замена кодона Arg472 на стоп-кодон) сопровождается потерей им способности правильно собираться в клетках бактерий E. coli. На основании полученных данных сделан вывод, что C-концевые аминокислотные остатки цитохрома Р450scc (∆Arg472−Ala481) играют важную роль в правильной сборке рекомбинантного белка и необходимы для связывания гема при экспрессии цитохрома Р450scc в E. coli, а фолдинг митохондриального цитохрома Р450scc при его гетерологической экспрессии в бактериальных клетках схож с фолдингом растворимых гемопротеидов прокариот, а не микросомальных цитохромов Р450 эукариот.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: