Анализ специфичности антител против синтетических фрагментов субъединиц различных нейрональных никотиновых холинорецепторов

Аннотация

Проведено сравнение набора поликлональных антител против синтетических фрагментов α7-субъединицы гомоолигомерного ацетилхолинового рецептора (АХР), а также некоторых субъединиц гетеромерных АХР. Для этого методом иммуноферментного анализа исследовано взаимодействие антител с экстрацеллюлярным доменом (аминокислотные остатки 7–208) α7-субъединицы АХР крысы, полученным с помощью гетерологической экспрессии в E. coli, а также с мембранами надпочечников крысы. Для сравнения использованы мембраны из электрического органа ската Torpedo californica, обогащенные АХР мышечного типа, а также поликлональные антитела, полученные против экстрацеллюлярного домена 1–209 α1-субъединицы АХР T. californica. Специфичность антител охарактеризована также с помощью иммуноблоттинга на экстрацеллюлярном домене α7(7–208) АХР крысы и на мембранно-связанном АХР T. californica. Анализ расположения выбранных эпитопов в рамках модели экстрацеллюлярного домена АХР, построенной на основании описанной в литературе кристаллической структуры ацетилхолинсвязывающего белка, показывает, что эпитоп 179–190 располагается на петле С, которая экспонирована и подвижна. С помощью антител против α7(179–190) показано присутствие α7-АХР в надпочечниках крысы.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: