БИОХИМИЯ, 2006, том 71, вып. 6, с. 815–824
УДК 577.152.3
Изучение взаимодействия α2-макроглобулина человека и дуоденазы – сериновой протеазы с двойной специфичностью
1 МГУ им. М.В. Ломоносова, химический факультет
2 Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН
Поступила в редакцию 25.10.2005
После доработки 15.12.2005
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: дуоденаза, α2-макроглобулин, ингибирование, стехиометрия, кинетика.
Аннотация
Исследовано взаимодействие дуоденазы – сериновой протеазы дуоденума быка и α2-макроглобулина сыворотки человека. Установлено, что α2-макроглобулин является одним из наиболее эффективных ингибиторов дуоденазы. Полное ингибирование фермента достигается менее, чем за 30 с при эквимолярном соотношении ингибитора и фермента (концентрация 2 · 10–8 М). В идентичных условиях, скорость ассоциации дуоденазы и α2-макроглобулина превышает скорость ассоциации химотрипсина с этим ингибитором по крайней мере в 2,5 раза. Показано, что в результате взаимодействия с дуоденазой происходит протеолиз субъединицы ингибитора в районе «приманки». Подобно другим протеазам, дуоденаза в комплексе с α2-макроглобулином сохраняет неповрежденным каталитический аппарат и способность гидролизовать некоторые небольшие субстраты. При этом комплекс дуоденаза–ингибитор полностью неактивен по отношению к белковым субстратам (бычий сывороточный альбумин). Стехиометрия взаимодействия фермент:ингибитор составляла 2 : 1 (моль/моль). Оценка константы скорости ассоциации и времени завершения реакции ассоциации дуоденазы и α2-МГ in vivo позволяет предположить, что α2-МГ может являться физиологическим регулятором фермента.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.