Состояние ядрышковых белков B23/нуклеофозмина и UBF в клетках HeLa при апоптозе, индуцируемом фактором некроза опухолей^*

Аннотация

Впервые оценено структурное состояние двух ключевых белков ядрышка UBF и B23/нуклеофозмина (как мономерных, так и олигомерных форм) при воздействии на клетки HeLa индукторов апоптоза: фактора некроза опухолей (TNF-α), эметина, а также их смеси. Выявлено, что обработка клеток как TNF-α, так и эметином не приводит к апоптозу и не влияет на состояние UBF и нуклеофозмина (как мономерных, так и олигомерных форм). Эффективный апоптоз клеток HeLa наблюдался только при воздействии смеси TNF-α и эметина. Проанализировано состояние UBF и белка B23 в образцах, содержащих 25, 45 и 100% клеток с апоптозными ядрами. Методом иммуноблотинга показано, что при TNF-α-индуцированном апоптозе клеток HeLa происходит протеолиз UBF c образованием 76 кДа-фрагмента, увеличение содержания которого коррелирует с долей клеток, подвергшихся апоптотическим изменениям. Охарактеризованы N- и С-концевые аминокислотные последовательности UBF и его 76 кДа-фрагмента, идентифицирована точка апоптоз-индуцированного специфического протеолиза. В отличие от UBF, белок B23 не подвергается протеолитической деградации в ходе TNF-α-индуцированного апоптоза клеток HeLa и содержание белка не изменяется даже во фракции клеток, где практически все ядра фрагментированы. Однако в апоптотических клетках изменяется мономер-олигомерное состояние белка B23 и детектируются апоптоз-специфические формы нуклеофозмина.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: