БИОХИМИЯ, 2006, том 71, вып. 3, с. 417–425
УДК 577.112.8
Определение констант связывания липополисахаридов различной структуры c хитозаном
Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВО РАН
Поступила в редакцию 20.04.2005
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: липополисахарид, хитозан, тропеолин 000-2, константы связывания, О-специфическая цепь ЛПС.
Аннотация
Изучено взаимодействие эндотоксинов – липополисахаридов (ЛПС) различной степени полимеризации О-специфической цепи – с хитозаном с молекулярными массами 20 и 130 кДа с использованием конкурентного связывания ЛПС с комплексом хитозан–анионный краситель (тропеолин 000-2) и прямого связывания меченого [125I]-ЛПС с хитозаном, иммобилизованным на сефарозе 4В. Показано, что хитозан с молекулярной массой 20 кДа взаимодействует с ЛПС некооперативно, а иммобилизация поликатиона на сефарозе приводит к его связыванию с [125I]-ЛПС с положительной кооперативностью. При взаимодействии ЛПС с длинной О-специфической цепью с хитозаном с молекулярной массой 130 кДа отмечена отрицательная кооперативность. Определены константы связывания ЛПС с поликатионом и число мест связывания в расчете на одну аминогруппу хитозана. Показано, что на аффинность взаимодействия и стехиометрию комплексов ЛПС–хитозан значительное влияние оказывают структура ЛПС и его концентрация в реакционной смеси. Увеличение длины углеводных цепей ЛПС приводит к увеличению значений констант связывания и уменьшению количества связанного эндотоксина.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.