БИОХИМИЯ, 2006, том 71, вып. 3, с. 396–401
УДК 577.152.3
Новый метод спектрофотометрического определения каталитической активности поперечно сшитых агрегатов пенициллинацилазы
НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского, факультет биоинженерии и биоинформатики МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 04.04.2005
После доработки 12.05.2005
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: поперечно сшитые агрегаты фермента, пенициллинацилаза, метод определения активности, цветные субстраты.
Аннотация
Предложен метод непрерывной регистрации протекания ферментативных реакций, катализируемых иммобилизованным ферментом – поперечно сшитыми агрегатами пенициллинацилазы. Подобраны подходящие хромогенные субстраты для спектрофотометрического слежения за каталитической активностью иммобилизованного фермента и определены кинетические параметры их превращения. С использованием разработанного метода проведено титрование активных центров в препарате поперечно сшитых агрегатов ПА и показано, что практически все активные центры фермента сохраняются при иммобилизации. Отмечено, что разработанный метод отличается высокой экспрессностью, точностью и простотой и может быть использован как для контроля эффективности процесса иммобилизации ПА, так и для изучения операционной, температурной и рН-стабильности препаратов иммобилизованного фермента.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.