БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 12, с. 1646–1655
УДК 577.152.2
Функциональное сопряжение между нуклеозиддифосфаткиназой наружного компартмента митохондрий и окислительным фосфорилированием*
Кафедра биохимии, биологический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 18.03.2005
После доработки 31.05.2005
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: нуклеозиддифосфаткиназа, митохондрии печени, окислительное фосфорилирование, функциональное сопряжение.
Аннотация
Ранее нами было установлено, что в митохондриях печени крысы вся нуклеозиддифосфаткиназа наружного компартмента локализована на наружной поверхности наружной мембраны. В настоящей работе проанализированы три системы, в одной из которых функцию донора ADP для окислительного фосфорилирования выполняла связанная с внешней мембраной нуклеозиддифосфаткиназа, а в двух других – обладающие такой же активностью, но не связывающиеся с мембранами митохондрий дрожжевая гексокиназа или дрожжевая нуклеозиддифосфаткиназа. Во всех трех системах роль внешнего агента, конкурирующего с системой окислительного фосфорилирования за потребление ADP, играла мышечная креатинкиназа. Определена скорость дыхания митохондрий в присутствии возрастающих количеств креатинкиназы. Установлено, что при большом избытке активности креатинкиназы по сравнению с активностью остальных киназ и системы окислительного фосфорилирования креатинкиназная реакция приходила в состояние квазиравновесия. В этих условиях в системе с активной дрожжевой гексокиназой определены равновесные концентрации всех субстратов креатинкиназы и рассчитана константа Kравнкаж этой реакции. В пробах с активной митохондриальной нуклеозиддифосфаткиназой определены концентрации ATP, креатина и креатинфосфата. С использованием величины Kравнкаж рассчитана квазиравновесная концентрация ADP. Установлено, что при равенстве квазиравновесных концентраций ADP и отношения ATP/ADP скорость дыхания митохондрий в системе с митохондриальной нуклеозиддифосфаткиназой составила 21% скорости дыхания в отсутствие креатинкиназы, а в системе с дрожжевой гексокиназой – 7%. Разница в скоростях дыхания исчезала, если митохондриальная нуклеозиддифосфаткиназа была заменена на дрожжевую. Сделан вывод, что во время окислительного фосфорилирования между митохондриальной нуклеозиддифосфаткиназой и системой окислительного фосфорилирования возникает функциональное сопряжение. Обсуждены возможные механизмы возникновения этого сопряжения.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, ВМ05-080, 23.10.2005.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.