БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 11, с. 1548–1555

УДК 577. 152.3

Выделение и очистка ферментов лигнинолитического комплекса базидиального гриба Trametes pubescens (Schumach.) Pilát и исследование их свойств

© 2005 О.В. Никитина 1, С.В. Шлеев 1, Е.С. Горшина 2, Т.В. Русинова 2, В.А. Сереженков 3, Д.Ш. Бурбаев 3, Л.В. Беловолова 4, А.И. Ярополов 1*

1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

2 Московский государственный университет инженерной экологии

3 Институт химической физики им. Н.Н. Семенова РАН

4 Институт общей физики им. А.М. Прохорова РАН

Поступила в редакцию 14.10.2004
После доработки 30.12.2004

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Trametes pubescens, лакказа, лигнинпероксидаза, спектральные свойства.

Аннотация

Разработан метод очистки ферментов лигнинолитического комплекса базидиального гриба Trametes pubescens (Schumach.) Pilát. Получены в гомогенном состоянии две изоформы лакказы (лакказа 1 и лакказа 2), а также лигнинпероксидаза. Определены основные биохимические параметры этих ферментов, такие как молекулярная масса (67, 67 и 45 кДа соответственно); изоэлектрическая точка (5,3, 5,1 и 4,2 соответственно); содержание и состав углеводной части лакказ, в который входят N-ацетилглюкозамин, манноза, ксилоза. Определены рН-зависимость и термостабильность лакказ. Найдены кинетические параметры ферментативных реакций, катализируемых лакказами по ряду субстратов (пирокатехин, гидрохинон, 2,2′-азинобис-(3-этилбензтиазолин-6-сульфонат), гексацианоферрат (II) калия). Активные центры обеих выделенных лакказ и лигнинпероксидазы исследованы методами ЭПР-, КД-, УФ- и видимой спектроскопии, а также флуоресцентным методом. Показана близость спектральных характеристик обеих лакказ и отличие их кинетических параметров.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.